在试管婴儿技术中,胚胎冷冻保存是一项极其重要的技术,在遇到一些不适合鲜胚移植的情况时,就可以选择将胚胎冷冻,等到条件成熟再进行移植,进而提高试管婴儿的成功率。那么,冻胚冻久了会不会影响质量?
1胚胎冷冻是如何实现的
冷冻胚胎是一种成熟的保存生育功能的方法,是将通过试管培育技术得到的胚胎,存置于零下196℃的液氮环境中,得到长时间保存。
2冻胚冻久了会不会影响质量
离体的精子、**还有胚胎其实是非常娇气的,对温度、湿度、CO2气体浓度要求非常严格。但是,将体外受精发育而成的胚胎冻进-196℃的液氮八年、十年乃至更久复苏后胚胎依然成活,移入**后能够发育成一个健康的婴儿。如此娇气的胚胎怎么这么抗冻呢?其实胚胎抗冻与冷冻原理和先进的冷冻技术有关。
冷冻较大的伤害就是细胞内的水在冷冻过程中形成冰晶。冰晶过大就会划伤细胞膜和细胞器造成物理损伤,以及形成冰晶后改变电解质浓度造成化学损伤。
因此,尽可能的给细胞脱水减少冰晶的形成是各种冷冻保护试剂的主要作用,同样,复苏时,迅速升温给细胞复水则是解冻后胚胎存活的关键。
将胚胎和冷冻液装入冷冻管中,经过降温使胚胎静止下来,然后再在-196度的液氮中保存。一般冻胚是在同时培育出多个胚胎的情况下,保证鲜胚的植入后,将剩余的质量较好的胚胎冷冻保存,待以后自然周期或人工周期解冻后植入**腔内,以增加受孕的机会。但是冷冻和解冻的过程中,会降低胚胎的活性。冻胚移植需要经过液氮的保存,然后再解冻。在冷冻和解冻的过程中,有一个优胜劣汰的过程。在这个过程总会把质量比较差的胚胎淘汰掉。相对于鲜胚来说,成功率会更高一点。
3胚胎冷冻的主要方式
程序化冷冻
胚胎首先进入一个高浓度的渗透性冷冻保护剂中,因为浓度高,细胞外的渗透压远高于细胞内渗透压,水分子就在这种压力差的作用下逐渐外渗。所以,此时细胞脱水皱缩。在水分子外渗的过程中,后期渗透性保护剂也开始进入胞内,细胞由皱缩呈现膨胀状态,恢复初始大小。
然后,再将胚胎移入非渗透性保护剂中,因为是非渗透性只增加了细胞外渗透压,不进入细胞内,细胞继续脱水至平衡状态。平衡后,借助程序冷冻仪胚胎以0.2-2.0℃的速度程序降温至-80℃,此过程进一步脱水,较后移入液氮中。
玻璃化冷冻
胚胎冷冻的原理都是脱水之后降温,相比程序化冷冻,玻璃化冷冻操作简单,不需要设备,目前应用越来越广。不同之处是,冷冻保护剂以更快的速度降温,从而使液体直接转变成玻璃状态,没有冰晶形成。
但这种冷冻试剂有浓度高、粘度大等特点同时胚胎毒性也大。因此在降温阶段,需要在几十秒内完成,这对操作提出了更高要求。
如果是囊胚冷冻,除了借助冷冻保护剂脱水,还需要人工皱缩,也就是“放水”,通过显微操作针或者激光在透明带上穿一小孔,使囊胚腔内的液体自然流出,皱缩成一团后再进行冷冻。
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